银杏内酯C标准样品的研制

doi:10.3976/j.issn.1002-4026.2022.02.003

山东科学 ›› 2022, Vol. 35 ›› Issue (2): 18-28.doi: 10.3976/j.issn.1002-4026.2022.02.003

银杏内酯C标准样品的研制

宁凡盛^1,a^1b(),路岩翔²,曹桂云³,孟兆青³,闫慧娇^1,^*(),王岱杰^1,a^1,b^*()

1.齐鲁工业大学(山东省科学院) a.山东省分析测试中心; b.药学院,山东济南 250014
2.济南市行政审批服务局,山东济南 250001
3.山东宏济堂制药集团股份有限公司,山东济南 250000

收稿日期:2021-06-21 出版日期:2022-04-20 发布日期:2022-04-07
通信作者: 闫慧娇,王岱杰 E-mail:nh1228@163.com;yanhuijiao01@163.com;wangdaijie@126.com
作者简介:宁凡盛(1991—),男,硕士研究生,研究方向为天然产物化学。E-mail: nh1228@163.com
基金资助:
齐鲁工业大学(山东省科学院)科教产融合创新试点工程项目(2020KJC-GH08)

Preparation of certified reference material of Ginkgolides C

NING Fan-sheng^1,a^1b(),LU Yan-xiang²,CAO Gui-yun³,MENG Zhao-qing³,Yan Hui-jiao^1,^*(),Wang Dai-jie^1,a^1,b^*()

1. a.Shandong Analysis and Test Center; b.School of Pharmaceutical Sciences, Qilu University of Technology (Shandong Academy of Sciences), Jinan 250014, China
2. Jinan Administrative Examination and Approval Department, Jinan 250001, China
3. Shandong Hongjitang Pharmaceutical Group Co., Ltd., Jinan 250103, China

Received:2021-06-21 Online:2022-04-20 Published:2022-04-07
Contact: Hui-jiao Yan,Dai-jie Wang E-mail:nh1228@163.com;yanhuijiao01@163.com;wangdaijie@126.com

摘要/Abstract

摘要：

以《标准样品工作导则(3)标准样品定值的一般原则和统计方法》为依据,研制银杏内酯C的国家标准样品。样品原料为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶,采用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱技术,结合制备液相精制,纯化和制备了银杏内酯C,并通过紫外、红外、质谱和核磁共振等技术手段进行了结构确认。进行了薄层色谱鉴别,建立了液质联用分析技术,进行了均匀性、稳定性和定值实验。结果表明,样品均匀性良好,在0~4 ℃ 储存条件下2年内稳定,定值结果确定其纯度为(99.85±0.06)%。研制的银杏内酯C符合国家标准样品的要求,可用于与银杏内酯C相关产品的含量测定、质量控制和检测方法的评定等。

关键词: 标准样品, 银杏内酯C, 纯度分析, 均匀性检验, 稳定性检验, 定值分析

Abstract:

To develop a national certified reference material (CRM) of Ginkgolide C according to the technical requirements of Directives for the work of reference materials - Reference materials - General and statistical principles for certification, Ginkgolide C was purified and obtained using silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 gel column chromatography technology, and preparative liquid chromatography from dried leaves of Ginkgo biloba L. The structure was confirmed by UV, IR, HR-MS, ¹H-NMR, and ¹³C-NMR. The identification of thin-layer chromatography was performed, and the LC-MS technique was established. Homogeneity test, stability test, and certification analysis were conducted. Results show that the samples were stable under the storage condition of 0~4 ℃ for 2 years; the certification analysis result confirms that its purity is (99.85±0.06)%. The developed Ginkgolide C meets the technical requirements of national certified reference material per GB/T 15000.3—2008, which can be used for content determination, quality control, and detection method evaluation of Ginkgolide C and related products.

Key words: certified reference material, Ginkgolides C, purity analysis, homogeneity test, stability test, certification analysis

中图分类号:

R284.2

宁凡盛,路岩翔,曹桂云,孟兆青,闫慧娇,王岱杰. 银杏内酯C标准样品的研制[J]. 山东科学, 2022, 35(2): 18-28.

NING Fan-sheng,LU Yan-xiang,CAO Gui-yun,MENG Zhao-qing,Yan Hui-jiao,Wang Dai-jie. Preparation of certified reference material of Ginkgolides C[J]. Shandong Science, 2022, 35(2): 18-28.

图/表 13

图1

图2

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表1

表2

表3

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参考文献 26

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¹H	测定值(DMSO-d6,400 MHz)	文献值^[25] (DMSO-d6,400 MHz)	¹³C	测定值(DMSO-d6,100 MHz)	文献值^[25](DMSO-d6,100 MHz)
1	3.99 (1H, dd, 7.2, 3.6)	4.01 (1H, d, 7.0)	1	74.1	73.72
OH-1	4.97 (1H, d, 3.6)	4.87 (1H, brs)	2	92.3	91.90
2	4.63 (1H, d, 7.2)	4.60 (1H, d, 7.0)	3	83.3	83.01
OH-3	6.48 (1H, s)	6.39 (1H, brs)	4	98.7	98.32
6	4.97 (1H, d, 4.0)	4.98 (1H, d, 4.0)	5	66.8	66.40
7	4.06 (1H, m)	4.08 (1H, m)	6	79.5	79.11
OH-7	5.58 (1H, d, 6.2)	5.58 (1H, brs)	7	74.4	74.12
8	1.55 (1H, d, 12.4)	1.58 (1H, d, 12.5)	8	49.4	49.01
10	5.00 (1H, d, 5.6)	4.99 (1H, d, 5.0)	9	64.2	63.79
OH-10	7.54 (1H, d, 5.6)	7.43 (1H, brs)	10	69.4	69.00
12	6.10 (1H, s)	6.09 (1H, s)	11	174.3	173.94
14	2.82 (1H, q, 7.0)	2.82 (1H, q, 7.0)	12	109.9	109.57
16	1.12(3H, d, 7.0))	1.13(3H, d, 7.0)	13	171.0	170.64
t-Bu	1.09 (9H, s)	1.12 (9H, s)	14	42.0	41.56
			15	176.8	176.44
			16	8.3	7.93
			17	32.4	31.95
			18	29.4	28.92
			19	29.4	28.92
			20	29.4	28.92

瓶号	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
第一次抽样测量值/%	99.80	99.83	99.82	99.83	99.85	99.81	99.83	99.81	99.81	99.81
第二次抽样测量值/%	99.80	99.82	99.80	99.83	99.83	99.80	99.80	99.83	99.83	99.82
第三次抽样测量值/%	99.81	99.83	99.84	99.84	99.82	99.82	99.81	99.85	99.82	99.80
平均值/%	99.80	99.83	99.82	99.83	99.83	99.81	99.81	99.83	99.82	99.81
方差	3.3×10^-5	3.3×10^-5	4.0×10^-4	3.3×10^-5	2.3×10^-4	1.0×10^-4	2.3×10^-4	4.0×10^-4	1.0×10^-4	1.0×10^-4
总体平均值/%	99.82

变差源	方差(SS)	自由度(DF)	均方(MS)
瓶间	0.003 067	9	0.000 341
瓶内	0.003 333	20	0.000 167
总和	0.006 400	29

时间/月	测定结果/%	平均值/%	标准偏差/%	置信度为95%的扩展不确定度/%
0	99.89;99.87;99.86;99.90;99.85	99.87	0.03
6	99.82;99.82;99.83;99.81;99.80	99.82	0.02
12	99.83;99.85;99.86;99.85;99.83	99.84	0.02	0.16
18	99.83;99.82;99.85;99.84;99.82	99.83	0.02
24	99.78;99.81;99.80;99.79;99.81	99.80	0.02

序号	检测结果/%						平均值/%	标准偏差/%
序号	1-1	1-2	2-1	2-2	3-1	3-2	平均值/%	标准偏差/%
1	99.93	99.88	99.88	99.91	99.86	99.94	99.90	0.04
2	99.86	99.82	99.82	99.88	99.91	99.83	99.85	0.04
3	99.93	99.86	99.90	99.88	99.82	99.92	99.89	0.05
4	99.88	99.83	99.82	99.91	99.88	99.84	99.86	0.04
5	99.82	99.89	99.87	99.81	99.85	99.82	99.84	0.04
6	99.79	99.77	99.81	99.76	99.79	99.83	99.79	0.03
7	99.85	99.89	99.85	99.81	99.92	99.86	99.86	0.04
8	99.77	99.82	99.84	99.81	99.78	99.85	99.81	0.04

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