综合运用一维和二维核磁共振波谱技术,对茜草提取物中大叶茜草素、羟基茜草素的信号进行指认归属,并建立氢核磁共振法同时测定茜草中大叶茜草素、羟基茜草素含量的方法。在综合考虑茜草提取物的信号分离度及溶解性的基础上,最终选定氘代二甲基亚砜为测试溶剂,以大叶茜草素的烯烃信号(δH 5.77, H-2′)和羟基茜草素的H-3信号(δH 6.67)为定量峰,以顺丁烯二酸为定量内标。该方法具有较好的稳定性、重复性、精密度和准确性,且测定结果与HPLC-UV方法所得数据基本一致。所建立的氢核磁定量方法操作简单,测试时间短,且定量过程中不需要对照品,可用于中药茜草的质量控制及评价。